Test-tube fertilization inNicotiana tabacum by means of an artificial pollen tube culture

Abstract
Three techniques of the test-tube fertilization by means of an artificial pollen tube culture are described. The essentials for each individual method are: Transfer of pollen tubes from the sugar solution onto the placentae in the test tube. Placing the placentae with ovules onto pollen tube culture. Precultivation of pollen tubes on small cellophane squares placed on the surface of a semi-liquid medium and transfer of cellophane squares along with the pollen culture to the solid medium, over which finally the placentae with ovules are placed. By means of all the three techniques viable seeds were obtained in vitro. In an artificial medium pollen tubes are able to maintain their fertilizing ability even after the 24 hours cultivation, i.e. at the time after the formation of the gametes. Jsou popsány tři metody oplození in vitro předpěstovanými pylovými láčkami. Podstatné pro jednotlivé metody je: Přenesení pylových láček z cukerných roztoků do zkumaveks placentami. Umístění placents vajíčky do kultury pylových láček. Předpěstování pylových láček na kouscích celofánu položených na polotekutou půdu a jejich přenesení pomocí celofánu na pevnou půdu, na kterou se nakonec umístí placentys vajíčky Všemi třemi způsoby byla in vitro získána klíčivá semena. Pylové láčky si zachovávají v umělé kultuře oplozovací schopnost i podvaceti hodinách kultivace, t. j. v době po vytvoření gamet. Описаны три метода оплодотворения пыльцевыми трубками выращеннымиin vitro. Отдельные методы характеризуются следующими особенностями: Пыльцевые трубки переносят из растворов сахара в пробирки с плацентами. Плаценты с яйцеклетками помешают в культуру пыльцевых трубок. Пыльцевые трубки выращивают сперва на кусках целлофана положенных на полужидкую среду а потом переносят с целлофаном на плотную среду, на которую впоследствии помешают плаценты с яйцеклетками. Во всех случаях полученыin vitro жизнеспособные семена. Пыльцевые трубки сохраняют в культуре способность к оплодотворению даже после два]qdцатичасовой культивации, т.е. после образования гамет.