Determination of the bacteriostatic capacity of neutrophils and monocytes in mixed cell populations

Publisher Website
Google Scholar
Abstract
Cline [1,2] described a method of determining the phagocytic and bacteriostatic activity of individual types of leukocytes within mixed cell populations. We tried to improve the applicability of this method for the investigation of clinical problems. — Bacteria in the log-phase of growth were incubated in test tubes with leukocytes separated from venous blood. After a short period of phagocytosis3H-thymidine was added to label DNA-synthesizing organisms. Smears were prepared and processed by autoradiography. The labeling indices of extracellular bacteria and of those phagocytized by neutrophils and monocytes were determined microscopically. The intracellular inhibition of DNA-synthesis was taken as indicative of the bacteriostatic activity of the leukocytes. The proposed modification ofCline's assay is suited to investigate clinical problems of phagocyte dysfunction. Cline [1,2] beschrieb eine Methode zur Bestimmung der Phagozytose und der bakteriostatischen Aktivität individueller Leukozyten in gemischten Zellpopulationen. Wir versuchten die Methode dieses Tests zu verbessern, um klinische Fragestellungen angehen zu können. — Bakterien in log-Phase wurden zusammen mit Leukozyten, die aus venösen Blutproben durch Differentialsedimentation gewonnen wurden, inkubiert. Nach einer kurzen Zeit der Phagozytose wurden DNA-synthetisierende Bakterien durch3H-Thymidin markiert. Danach wurden mit Hilfe autoradiographierter Ausstrichpräparate die Markierungsindizes der extrazellulären Keime und der von Neutrophilen und Monozyten phagozytierten Keime bestimmt. Aufgrund der intrazellulären Hemmung der DNA-Synthese wurde die bakteriostatische Aktivität der Phagozyten berechnet. Mit dieser modifizierten Technik läßt sich die bakteriostatische Kapazität der Phagozyten des Blutes ohne Schwierigkeiten bestimmen, auch wenn die Leukozytenzahl erniedrigt ist.