Zur Problematik des Konduktorinnen-Nachweises bei der Hämophilie A: Fehlermöglichkeiten bei der Bestimmung des Faktor VIII-assoziierten Antigens

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Abstract
Im ersten Teil der Arbeit werden die Schwierigkeiten des Konduktorinnen-Nachweises der Hämophilie A durch die Bestimmung des Quotienten aus Gerinnungsaktivität und Konzentration des Faktor-VIII-assoziierten Antigens gezeigt. Danach wird der Einfluß methodischer Fehlerquellen auf die Bestimmung des Faktor-VIII-assoziierten Antigens beschrieben. Es zeigt sich, daß gleichzeitige Mehrfachbestimmungen, Eichung jeder Gelplatte und Verdünnung der Plasmen unter eine Konzentration von 100% erforderlich sind. Faktor-VIII-Konzentrate ergeben dagegen bei Verdünnung eine falsch niedrige errechnete Ausgangskonzentration. Die Lagerung gepoolter Normalspenderplasmen bei −25° C ist über fünf Monate ohne Konzentrationsverlust möglich, Einzelspenderplasmen zeigen dagegen innerhalb des gleichen Zeitraums Konzentrationsschwankungen über den methodischen Streubereich hinaus. Difficulties in the detection of haemophilia A carriers by the determination of the ratio factor VIII coagulation activity to factor VIII antigen concentration are shown in part one of our investigations. The second part evaluates methodical parameters of the quantitative immunoelectrophoretic technique. According to our results reliable data can only be obtained under the following conditions: At least three determinations of each sample are required and the mean value should be used as the final result Each gel plate should be calibrated separately The calibration line should include values less than 100%. Factor VIII concentrates are not suitable for determination of the calibration curve, as higher dilution results in lower calculated concentration of the undiluted concentrate. Storage of pooled normal plasma at −25° C is possible without significant loss of antigen concentration over 5 months. However, plasma samples of a single person show an unpredictable variation in the antigen concentration during storage over the same time.