Cold-sensitivity of heterokaryons ofCandida albicans

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Abstract
Heterokaryons (hets) of Candida albicans are formed by fusing protoplasts of complementing auxotrophs. Het clones typically contain two kinds of monokaryons — parental-type auxotrophs arising by segregation of constituent nuclei, and prototrophs resulting from segregation of hybrid nuclei formed through infrequent karyogamy within het cells. Hets, but not their parental strains or monokaryotic derivatives, die in cultures held at 5°C–15°C. Death occurs at a high exponential rate during the first two days at low temperature and at a lesser exponential rate thereafter: death rates are highest at 10°C. Inactivation is not influenced significantly by the kinds of auxotrophies forcing heterokaryosis or by difference or identity in the wild type backgrounds of the auxotrophs used to construct the hets. It is also unaffected by amino acid analogues, specific inhibitors of mitochondrial protein synthesis or the general inhibitor of DNA synthesis, hydroxyurea. Inactivation is promoted by purine or pyrimidine analogues and impeded by specific inhibitors of mitochondrial DNA synthesis and transcription or oxidative phosphorylation. As a rule, cold-sensitive mutants of eukaryotic microorganisms are defective for production and assembly of components of cytoplasmic or mitochondrial ribosomes at restrictive temperatures. Our observations suggest that comparable defects in biogenesis of mitochondrial ribosomes are normal properties of C. albicans hets. Des hétérocaryons (hets) de Candida albicans ont été obtenus par fusion de protoplastes provenant de souches auxotrophes complémentaires. Les clones hets contiennent 2 sortes de monocaryons: les auxotrophes de type parental, résultat de la ségrégation des noyaux parentaux et les prototrophes, résultant de la ségrégation de noyaux hybrides formés exceptionnellement par caryogamie. Les hets, à la différence des souches parentales, ou des recombinés monocaryotiques, meurent en cultures entre 5° et 15°C. La mortalité est exponentielle; durant les 2 premiers jours, à basse température, le taux est élevé, par la suite il est plus faible: le taux de mortalité est le plus élevé à 10°C. L'inactivation n'est past significativement influencée per les types d'auxotrophies forçant l'hétérocaryose ou par une différence ou une similitude de l'origine du type sauvage des auxotrophes utilisés pour faire les hétérocaryons. Elle n'est pas non plus affectée par les acides aminés analogues, par les inhibiteurs spécifiques de la synthèse protéique mitochondriale ou par l'hydroxyurée, inhibiteur de la synthèse du DNA. L'inactivation est favorisée par les analogues de la purine ou de la pyrimidine et entravée par les inhibiteurs spécifiques de la synthèse du DNA mitochondrial et de la transcription ou de la phosphorylation oxydative. En règle générale, les mutants des microorganismes eucaryotes sensibles au froid sont déficients dans la production et l'assemblage des composants ribosomaux cytoplasmiques ou mitochondriaux à des températures restrictives. Nos observations suggèrent que de tels défauts survenant dans la biogénèse des ribosomes mitochondriaux sont des propriétés normales des hets de C. albicans.