Analysis of free amino acids in green coffee beans

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Abstract
Zur Bestimmung freier Aminosäuren in Rohkaffees wurde 9-Fluorenylmethyloxycarbonylchlorid als Vorsäulenderivatisierungsreagenz erfolgreich eingesetzt. Die Trennung der 27 in Rohkaffee bisher identifizierten bzw. quantitativ bestimmten freien Aminosäuren gelang weitestgehend vollständig. Extraktions-, Derivatisierungs- und Trennbedingungen sind detailliert beschrieben, Eichung sowie Ergebnisse der quantitativen Aminosäurenanalytik wurden statistisch abgesichert. Es konnte gezeigt werden, daß durch Anwendung des beschriebenen Extraktionsverfahrens 99,8% der mittels dieser Methode erfaßbaren freien Aminosäuren aus Rohkaffees extrahiert werden. Arabica- und Robusta-Rohkaffees weisen prinzipiell gleiche Haupt- und Minoraminosäuren auf. Erstmals wurden die freien Aminosäuren Ornithin, β-Alanin und Pipecolinsäure in Arabica- und Robusta-Rohkaffees sowie Hydroxyprolin in Arabica-Rohkaffees quantitativ bestimmt. For the determination of free amino acids in green coffee beans, 9-fluorenylmethylchloroformate was applied successfully as the precolumn derivatization agent. The separation of the 27 free amino acids of green coffee as yet identified or quantitatively determined is almost complete. The paper describes in detail the conditions of extraction, derivatization and resolution and presents reproducible data of standard curves and of quantitative results. It has been demonstrated that by applying the extraction procedure described, 99.8% of the free amino acids detectable by this method are extracted. On principle, Arabica and Robusta coffees contain the same main and minor amino acids. It was possible for the first time to determine the free amino acids ornithine, β-alanine and pipecolic acid quantitatively in Arabica and Robusta coffees as well as hydroxyproline in Arabica coffees.