Determination ofp-nitrophenol in serum and urine by enzymatic and non-enzymatic conjugate hydrolysis and HPLC. Application after parathion intoxication

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Abstract
In connection with the toxicologic analysis of a number of parathion intoxications a method for determination of free and conjugated forms ofp-nitrophenol (p-NP) as the main metabolite of parathion in blood and urine was established. Quantification of conjugates is based on their hydrolysis followed by detection ofp-NP using a sensitive HPLC method. Hydrolysis of bothp-NP-glucuronide andp-NP-sulfate is performed by specific enzymes and also by mineral acid, the latter is also found to be highly selective under definite conditions. The two hydrolysis methods applied showed a good correlation. The levels of free and conjugatedp-NP in series of blood and urine samples were established after survival from two parathion intoxications. The individual levels ofp-NP-sulfate andp-NP-glucuronide in both cases are discussed in respect of results made by other authors in this field. Zur toxikologischen Analytik von Parathion-Vergiftungen wurde eine Methode zur Bestimmung von freiem und konjugiertemp-Nitrophenol (p-NP) als Hauptmetabolit von Parathion in Blut und Urin erstellt. Grundlage des Verfahrens bildet ein empfindlicher HPLC-Nachweis vonp-NP nach Hydrolyse der Konjugate. Die Hydrolyse sowohl vonp-NP-Glucuronid als auch vonp-NP-Sulfat erfolgt enzymatisch und durch Säure-einwirkung, wobei auch das letztere Verfahren unter definierten Bedingungen sehr spezifisch ist. Beide Hydrolyseverfahren zeigten im Ergebnis gute Übereinstimmung. Die Spiegel von freiem und konjugiertemp-NP in einer Reihe von Blut- und Urinproben wurden nach zwei Fällen überlebter Parathion-Vergiftungen bestimmt. Die unterschiedlichen Spiegel vonp-NP-Sulfat undp-NP-Glucuronid werden für beide Fälle diskutiert und Ergebnisse anderer Autoren herangezogen.