Compartmentalization of Milk N‐acetyl‐β‐D‐glucosaminidase (NAGase)

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Abstract
Summary: About 55% of the lysosomal enzyme N‐acetyl‐β‐D‐glucosaminidase (NAGase) in newly collected mastitic milk was present within the cellular compartments, the centrifugate or the top cream layer. In milk from healthy quarters this percentage was even higher, 94%. The NAGase was released from the cellular compartments upon storage, a cycle of freezing and thawing, by stimulating cells with endotoxin or opsonized zymosan. Maximum release of activity was obtained by including 2% Triton X‐100 in the milk samples. NAGase analysis requires standardization of the sampling and handling of milk samples. Monitoring the release of NAGase into the skimmed milk fraction is suggested as a method for analyzing cellular activation.Zusammenfassung: Etwa 55% des lysosomalen Enzyms N‐acetyl‐β‐D‐glucosaminidase (NAGase) in frisch gewonnener Mastitismilch war in den zellulären Bestandteilen, im Zentrifugat oder in der obersten Sahneschicht vorhanden. In der Milch von gesunden Eutervierteln war dieser Prozentsatz noch höher, nämlich 94%. Die NAGase wurde aus den zellulären Komponenten nach Lagerung, durch abwechselndes Einfrieren und Auftauen und durch die Stimulierung von Zellen mit Endotoxin oder opsonisiertem Zymosan freigesetzt. Die maximale Aktivierung wurde mit dem Zusatz von 2% Triton X‐100 zu den Milchproben erreicht. Die NAGase‐Analytik setzt die Standardisierung der Entnahme und der Handhabung von Milchproben voraus. Die überprüfung der Freisetzung von NAGase in die entrahmte Milchfraktion wird als Methode zum Nachweis einer Zellaktivierung vorgeschlagen.