Electron Microscopy Studies of a Xylem‐Limited Bacterium in Sweet Orange Affected with Citrus Variegated Chlorosis Disease in Brazil

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Abstract
Citrus variegated chlorosis (CVC), a serious disease affecting sweet orange (Citrus sinensis Osb.) groves in São Paulo and Minas Gerais States, Brazil, was first observed in 1987 and found to be associated with a Gram‐negative, xylem‐limited bacterium (GVG‐B). Electron microscopic studies revealed that the bacterium may appear in situ evenly distributed in the lumen of the tracheary elements and, occasionally, embedded in a lucent matrix adhering to the inner surface of the cell wall elements. GVG‐B measured 1–3.5 μm × 0.3–0.5 μ m and appeared to be at different developmental stages; fibril‐like structures were seen attached to bacteria. GVG‐B rippled wall showed a periodical or annulated structural arrangement with thickness from 25–35 nm in the furrows and 45–55 nm in the ridges. The wall consisted of 3 layers, i.e., an outer, an inner (each comprised of 3‐layered unit membrane structure) and a middle peptidoglycan layer. DNA‐like threads and ribosome‐like granules were present in the cytoplasm. GVG‐B is structurally and morphologically similar to Xylella fastidiosa of which it could be a citrus strain or a strain from other hosts adapted to citrus.Zusammenfassung: Elektronenmikroskopische Untersuchungen eines im Xylem‐limitierten Bakteriums bei Süßorangen in Brasilien, die mit citrus variegated chlorosis disease infiziert sind Citrus variegated chlorosis (CVC), eine bedeutende Citruskrankheit bei Süßorangen (Citrus sinensis Osb.) in Plantagen in den brasilianischen Staaten Sao Paulo und Minas Gerais, wurde zum ersten Mai 1987 beobachtet, auch wurde ein Zusanimenhang mit einem Gram‐negativen, im Xylemlimitierten Bakterium (CVC‐B) festgestellt. Elektronenmikroskopische Untersuchungen haben gezeigt, daß das Bakterium in situ gleichmäßig im Lumen der Leitelemente verteilt sein kann, und auch manchmal in einer klaren, an der inneren Oberfläche der Zellwandelemente anhaftenden Matrix eingebettet. CVC‐B maß 1–3,5 μm × 0,3–0,5 μm und schien in unterschiedlichen Entwicklungsstadien zu sein; fibrilähnliche Strukturen waren mit den Bakterien verbunden. CVC‐B hat eine gekräuselte Wand, die eine regelmäßge oder geringelte strukturelle Anordnung zeigte. Die Wandstarke betrug 25–35 nm in den Rillen und 45–55 nm bei den Kämmen. Die Wand bestand aus 3 Schichten, d. h. einer aufieren, einer inneren (jede bestehend aus einer 3‐schichtigen Membranstruktur) und einer mittleren Peptidoglycanschicht. Im Cytoplasma befanden sich DNS‐ãhnliche Fäden und Ribosom‐ähnliche Körnchen. CVC‐B ist von der Struktur und der Morphologie mit Xyelella fastidiosaähnlich und könnte ein Stamm für Zitrusarten sein oder ist ein von einem anderen Wirt adaptierter Stamm von X. fastidiosa.