Cyclic AMP and anionic currents in porcine ciliary epithelium

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Abstract
Hintergrund Diese Pilot-Studie wurde durchgeführt, um zu testen, ob im isolierten Schweineziliarkörper die Erhöhung der intrazellulären cAMP-Konzentration eine Veränderung der Membranpermeabilität für Ionenströme bewirken kann. Methoden Änderungen im Membranpotential, ausgelöst durch Forskolin (Adenylatzyklaseactivator; 10 μM; n=4) oder das cAMP-Analogon 8-Bromoadenosine 3′,5′-cyclic monophosphothioate (8-Br-cAMP; 30 μM; n=4) wurden mittels intrazellulärer Mikroelektroden gemessen. Der Effekt von Forskolin und 8-Br-cAMP wurde ebenfalls in An- oder Abwesenheit des Anionenkanalinhibitors Diisothiocyanato-stilbene, 2,2′-Disulfonsäure (DIDS; 1 mM; n=3) untersucht. Resultate Forskolin und 8-Br-cAMP bewirkten beide eine signifikante (p < 0,001) Membranpotenzialdepolarisation (10,4 ± 2,0 mV und 11,7 ± 1,4 mV MW ± SEM). Die Depolarisationen induziert durch Forskolin und 8-Br-cAMP wurden durch DIDS (0,1 ± 1,0 mV und 0,7 ± 0,3 mV) gehemmt (pSchlussfolgerung Im isolierten Schweineziliarkörper führt die Erhöhung von cAMP zu einer Depolarisierung des Membranpotentials, ein Prozess, welcher Anionenkanäle zu involvieren scheint. Introduction To investigate whether in the ciliary epithelium of isolated porcine ciliary body cyclic 3′,5′ adenosine monophosphate (cAMP) activates transmembrane anionic currents. Methods Changes in membrane potential induced either by the adenylcyclase activator forskolin (10 μM; n=4) or the stable membrane permeable cAMP analog 8-bromo-adenosine 3′,5′-cyclic monophosphothioate (8-br-cAMP; 30 μM; n=4) were measured with intracellular microelectrodes. The effect of the drugs were assessed in the absence or in the presence of the non-selective anionic channel/transporter inhibitor diisothiocyanatostilbene-2,2′ disulfonic acid (DIDS; 1 mM; n=4). Results Significant (p < 0.001) membrane potential depolarization were induced by both forskolin (11.8 ± 0.3 mV) or 8-br-cAMP (9.3 ± 0.4 mV). In the presence of DIDS, a significant (p < 0.001) inhibition of the depolarization evoked by forskolin (0.9 ± 1.1 mV) and 8-bromo-cAMP (0.7 ± 0. 2 mV) was observed. Conclusions In the ciliary epithelium of isolated porcine ciliary body cAMP induces membrane potential depolarization through a process that could involve anionic channels.

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