Isolierung und Charakterisierung derl-Ascorbinsäureoxidase (EC 1.10.3.3) aus Weizenmehl

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Abstract
Wheat flour (Caribo, 0.55% ash) is extracted with 0.4 M-NaCl-solution, the L-ascorbic acid oxidase precipitated with (NH4)2SO4 and this concentrate separated by thinlayer isoelectric focussing on polyacrylamid-and dextrangel. 8–12 active fractions (isoenzymes) are detected with a high specifity forl-ascorbic acid in respect ind-isoascorbic acid activity). The molecular weights are 165,000–175,000 (determined by dextran gel-thin layer chromatography). In fresh flour the activity is near 28 mgl-ascorbic acid per kg flour in 30 min, after 30 days the activity has diminished to 5%, after 60 days no activity is detectable. Weizenmehl (Caribo, 0,55% Asche) wurde mit 0,4 m-NaCl-Lösung extrahiert, diel-Ascorbinsäureoxidase mit (NH4)2SO4 gefällt und das Konzentrat aufgetrennt mit der Dünnschichtisoelektrischen Focussierung an Polyacrylamid- bzw. Dextrangel. 8–12 aktive Fraktionen (Isoenzyme) werden festgestellt, die eine hohe Spezifität fürl-Ascorbinsaure gegenüberd-Isoascorbinsaure aufweiseri (im Mittel nur 7% Fremdaktivität). Die Molekulargewichte liegen zwischen 165 000 and 175 000 (bestimmt durch Dextrangel-Dünnschichtchromatographie). In frischem Mehl liegt die Aktivität bei 28 mgl-Ascorbinsäure pro kg Mehl in 30 min, nach 30 Tagen ist die Aktivität auf 5% abgesunken, nach 60 Tagen nicht mehr nachweisbar.