Méthode de fractionnement et de dosage des composés phosphorés tissulaires

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Abstract
Afin de pouvoir doser simultanément dans un ou plusieurs tissus, dans des états normaux ou physio-pathologiques, l’ensemble des fractions phosphorées, nous avons mis au point la méthode suivante: Le tissu frais est homogénéisé dans de l’acide perchlorique glacé et une première séparation donne a) une fraction acido-soluble sur laquelle on dose: - le P acido-soluble total - le P inorganique - le P labile de l’ATP que nous obtenons exempt de toute contamination par les esters phosphoriques des sucres, - les radicaux adényliques totaux. Le P des esters phosphoriques des sucres et le P de l’ADP sont estimés par des formules dont nous avons vérifié la validité. une fraction non acido-soluble destinée au dosage: - du P lipidique total après délipidation et dosage de P(i); - du P des acides nucléiques extrait par la technique de Fleck et Munro. Le dosage est effectué par estimations spectrophotométriques et l’application des formules de Tsanev et Markov donne la concentration de l’ARN et de l’ADN exprimée en mg P. Par ailleurs, le poids sec et le dosage de l’azote par la méthode de Kjeldahl donnent des bases de référence indispensables. Les résultats sont exprimés par rapport au P de l’ADN.

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