A New Rapid and Sensitive High‐Performance Liquid Chromatographic Assay for Diclofenac in Human Plasma

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Abstract
A new rapid and sensitive reversed‐phase HPLC method for the routine analysis of diclofenac in human plasma is described. The method shows high selectivity, sensitivity, and reproducibility employing 4′‐methoxydiclofenac as internal standard (IS) with UV‐detection at 282 nm. The correlation of peak area ratios (diclofenac/IS) versus diclofenac plasma concentrations are linear between 5.0—2000 ng/ml with a detection limit of 3 ng/ml. Intra‐ and interday precision studies yielded coefficients of variation < 6.2 % for all concentrations (range 20.0—1600 ng/ml). The method was applied for the assay of diclofenac in plasma of healthy volunteers after p.o. and rectal dosage of 50 mg diclofenac sodium and was found to be highly suitable for routine analyses. Ein schnelles und sensitives Verfahren zur Bestimmung von Diclofenac in Humanplasma mittels Hochdruck‐Flüssigkeitschromatographie Es wird eine neue, einfache und schnell durchzuführende hochdruckflüssigkeitschromatographische Methode für die Routine‐Analyse von Diclofenac in Humanplasma beschrieben. Das Verfahren zeigt hohe Selektivität, Empfindlichkeit und Reproduzierbarkeit. Die Detektion erfolgt mittels UV‐Absorptionsmessung bei 282 nm, 4′‐Methoxydiclofenac dient als interner Standard. Die Peakflächenverhältnisse von Diclofenac zu internem Standard, aufgetragen gegen die Plasmakonzentration, sind über den Bereich von 5.0 bis 2000 ng/ml linear bei einer Detektionsgrenze von 3 ng/ml. Der Variationskoeffizient lag in einem Bereich von 20.0–1600 ng/ml immer unterhalb von 6.2%. Die hier beschriebene Methode wurde bei der Bestimmung der Plasmakonzentration von Diclofenac bei gesunden Probanden nach p.o. und rektaler Gabe von 50 mg Diclofenac‐Natrium angewendet und erwies sich für die Routineanalytik als besonders geeignet.