Fractions of non-specific esterase in root tip ofVicia faba L. revealed by disc electrophoresis in acrylamide gel

Publisher Website
Google Scholar
Abstract
Fractions of non-specific esterase were studied in homogenates ofVicia faba L. root tips using disc electrophoresis in acrylamide gel. With α-naphthyl acetate, 7 bands were revealed in electrophoreograms, whereas only 5 bands appeared with naphthol AS acetate; the position of bands detected with naphthol AS acetate corresponds to 5 of 7 bands which appear when using α-naphthyl acetate. If incubated with α-naphthyl acetate, 1 band is totally blocked by the inhibitor E 600, whereas the other bands are weakened slightly and—more or less— proportionally, similarly, as if incubated with naphthol AS acetate. No bands appear after detection with α-naphthyl caprylate and with α-naphthyl myristate. Electrophoreograms developed with α-naphthyl propionate differ both from those treated with α-naphthyl acetate and from those treated with α-naphthyl butyrate. Remarkable, but only quantitative differences were revealed when comparing electrophoreograms from division, enlargement and maturation zones, detected with either α-naphthyl acetate, or α-naphthyl propionate. The non-specific esterase fractions revealed by disc electrophoresis are correlated with protein fractions distinguished in the same material by the same technique using xylene brilliant cyanine G staining and with fractions of the same enzyme found in sections of the same object treated histochemically. Pomocí diskové elektroforesy v akrylamidovém gelu byly sledovány frakce nespecifické esterasy v extraktech z apikální části kořenu koňského bobu. Při detekci azokopulační reakcí s α-naftylacetátem bylo na zymogramech patrno 7 pruhů, zatímco při detekci s naftol AS acetátem bylo nalezeno 5 pruhů; poloha pruhů u naftol AS acetátu odpovídá 5 pruhům u α-naftylacetátu. Při detekci α-naftylacetátem byl E 600 totálně inhibován jeden pruh, ostatní byly podobně jako u naftol AS acetátu inhibovány částečně a víceméně rovnoměrně. Po inkubaci s α-naftylkaprylátem a α-naftylmyristátem nebyly patrny žádné pruhy, zymogramy inkubované s α-naftylpropionátem a α-naftylbutyrátem se lišily jak od zymogramů vyvolaných s α-naftylacetátem tak navzájem. Při srovnání zymogramů ze segmentů ze zony meristematické, prodlužovací a ukončeného růstu byly s α-naftylacetátem a s α-naftylpropionátem zjištěny značné leč pouze kvantitativní rozdíly. Autoři korelují zde zjištěné esterasové frakce s dříve popsanými frakcemi bílkovinnými a snaží se identifikovat pruhy na zymogramech s frakcemi zjištěnýmiin situ. Дисковым электрофорезом в акриламидном геле анализировались фракции неспецифическои эстеразы в экстрактах из апикальной части корня конских бобов. При делекции реакцией азокопуляции с α-нафтилацетатом на зимограммах установлено 7 потос, при детекции с нафтол AS ацетатом найдено 5 полос. Положение 5 полос в обоих случаях взаимно соответствует. При опеределении α-нафтилацетатом была ингибитором E 600 полностью ингибирована одна полоса, остальные были также как при определении нафтол AS ацетатом ингибированы частично и более менее равномерно. После инкубирования с α-нафтилкаприлатом и α-нафтилмиристратом не было видно никаких полос, зимограммы инкубированные с α-нафтилпропионатом и α-нафтилбутиратом отличались как от зимограмм проявленных α-нафтилацетатом так и друг от друга взаимно. При сравнении зимограмм из сегментов меристематической зоны, зоны удлинения и зонй законченного роста, были α-нафтилацетатом и α-нафтилпропионатом установлены больше, но лишь количественные различия. Авторы приводят в соответствие установленные фракции эстеразы с ранее описанными велковыми фракциями и стремятся идентифицировать полосы на зимограммах с фракциями установленнымиin situ.