Aviäre Encephalomyelitis (AE): Züchtung, Titrierung und Lagerung des AE‐Virus für Lebendimpfstoffe

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Abstract
Zusammenfassung: 1. Für die Titrierung nicht embryoadaptierter AE‐Virusstämme ist die Methode des Beimpfens empfänglicher embryonierter Eier mit nachfolgendem Schlüpfenlassen der Küken gut geeignet. Die dabei ermittelten Virustiter (EID50) sind genauer und um etwa 102 höher als die minimal infektiöse Dosis (MID) bei oral geimpften Eintagsküken.2. Die AE‐Viruskonzentration ist im ganzen infizierten Hühnerembryo am 11. Tag p.i. (Stamm 37020) bzw. am 15. Tag p.i. (Stamm C 2653 = Nr. 1143), bei Infektion in den Dottersack am 4.—5. Bebrütungstag, mindestens ebenso hoch wie im Embryogehirn allein.3. Der Infektiositätstiter ungereinigter AE‐Viruslösungen nimmt bei +20 bis +22° C um etwa 100,15/Woche ab. Durch Chloroformreinigung oder Zusatz stabilisierender Substanzen wird die Haltbarkeit nur unwesentlich beeinflußt.4. Die Lyophilisierung des AE‐Virus mit Glukose (10%) als Stabilisator ist möglich. Dabei ist mit einer Titerminderung um etwa 1:10 zu rechnen.5. AE‐Virus vom Stamm C 2653, aus ganzen infizierten Embryos gewonnen, eignet sich zur Schutzimpfung in der Dosis von 103 EID50 per os oder über das Trinkwasser und ist sehr kontagiös.6. Die Beziehung zwischen dem Neutralisationsindex (NI) von AE‐Seren und dem Logarithmus der Serumverdünnung ist nicht linear. Bei geringgradigen Serumverdünnungen bis höchstens 1:100 ist mit einer Verringerung des NI um 1,9 zu rechnen, wenn das Serum um 1:10 verdünnt wird.Summary: Avian encephalomyelitis (AE): Cultivation, titration and handling of the virus for live vaccines1. For the titration of AE virus strains which have not been adapted to the chick embryo, the inoculation of susceptible embryonated eggs and allowing them to hatch is very suitable. The virus titres (EID50) obtained in this way are about 102 higher than the minimal infective dose (MID) for day‐old chicks infected orally.2. The concentrations of virus in the whole infected chick embryo 11 and 15 days after yolk‐sac infection on the fourth to fifth days of incubation are at least as high as in the embryo brain alone.3. The infective titre of unpurified virus solutions kept at 20–22° C. falls at the rate of about 10−0.15/week. Adding chloroform or stabilising substances improves the keeping quality only very little.4. Lyophilisation of the virus with 10% glucose as stabiliser is possible but reduces the titre to about one‐tenth.5. AE virus of strain C 2653 prepared from infected embryos is suitable for vaccination at a level of 103 EID50 orally or in the drinking water and is very contagious.6. Relationship between the neutralisation index (NI) of AE sera and the logarithm of the serum dilution is not linear. For moderate serum dilutions up to, at most, 1:100, the reduction in NI is about 1.9 when the serum is diluted 1:10.Résumé: L'encéphalo‐myélite aviaire (AE): culture, titration et conservation du virus pour l'utilisation comme vaccin vivant1. Pour la titration de souches de virus de l'encéphalo‐myélite aviaire non adaptées à l'embryon la méthode consistant à inoculer des oeufs réceptifs embryonés et à laisser éclore les poussins convient parfaitement. Les titres de virus trouvés ainsi (EID50) sont plus précis et d'environ 102 plus élevés que la dose minimale d'infection (MID) chez des poussins d'un jour infectés par voie buccale.2. La concentration du virus se trouve au moins aussi élevé dans l'ensemble de l'embryon infesté que dans le cerveau seul le 11e jour après l'inoculation (souche 37020), resp. le 15e jour (souche C 2653 = No 1143) et si l'infection a été effectuée dans le sac vitellin entre le 4e et le 5e jour d'incubation.3. Le titre d'infectiosité des solutions de virus non purifiées diminue entre +20 et +22° C d'environ 10−0,15 par semaine. La purification au chloroforme ou l'adjonction de substances stabilisées ne modifient la conservation que d'une façon insignifiante.4. La lyophilisation du virus en utilisant le glucose (10%) comme stabilisateur est possible. Il faut cependant compter dans ce cas avec une diminution du titre de 1:10.5. Le virus de la souche C 2653 obtenu à partir d'embryons entiers est utilisable pour la vaccination à la dose de 103 EID50 per os ou dans l'eau de boisson et est très contagieux.6. Les rapports entre l'index de neutralisation (NI) de sérums AE et le logarithme de la dilution n'est pas linéaire. Dans les dilutions faibles jusqu'à un maximum de 1:100 on doit compter avec une diminution de l'index de neutralisation de 1,9 quand le sérum est dilué de 1:10.Resumen: Encéfalomielitis aviar (EA): cultivo, titulación y almacenamiento del virus de la EA para vacunas vivas1. Para la titulación de cepas víricas de la EA no adaptadas a embriones resulta muy apropiado el método de inoculación a huevos receptibles embrionados con subsiguiente eclosión de los pollitos. Los títulos víricos aquí determinados (DIE50) son más exactos y en un 102 superiores que la dosis infecciosa minima (DIM) en pollitos de un día inoculados por vía oral.2. La concentración de virus de la EA es en todo embrión de pollo infectado en el décimoprimer día tras la infección (cepa 37 020) o el décimoquinto día tras la infección (cepa C 2653 = no 1143), en infección en el saco vitelino en el 4°—5° día de incubación, al menos igual de elevada que en el cerebro embrionario solo.3. El título de infecciosidad de soluciones virósicas de la EA no purificadas disminuye a + 20 hasta 22° C en unos 10−0,15/semana. Mediante purificación clorofórmica o adición de substancias estabilizadoras solo se influye escasamente sobre la conservación.4. La liofilización del virus de la EA resulta posible con glucosa (10%) como estabilizador. Aquí debe calcularse con una disminución del título en 1:10, aproximadamente.5. El virus de la EA de la cepa C 2653, obtenido a partir de embriones íntegros infectados, resulta apropiado para la vacunación protectora a la dosis de 103 DIE50 por vía oral o a través del agua de bebida y es muy contagioso.6. La relación entre el índice de neutralización (IN) de sueros de la EA y el logaritmo de la dilución del suero no es lineal. En diluciones séricas de escasos grados hasta 1:100 como máximo hay que contar con una disminución del IN en 1,9, cuando el suero se diluye al 1:10.