Verhalten von Holo-, Apo- und Coenzym der Peroxidase beim Erhitzen

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Abstract
The thermal reaction of the two components of the horseradish peroxidase—the apoenzyme and the prosthetic group—with that of the holoenzyme were compared. From this we conclude that the thermal inactivation of the peroxidase in aqueous solution is not caused by a change of the apoprotein alone, but rather by participation of the entire three-dimensional structure including the prosthetic group. Spectrophotometric studies of the inactivation process in the holoenzyme revealed that the absorbance of the Soret band changes parallely to a reduction of the enzyme activity during heating. Since it has been found that the Soret absorption increases again during storage and simultaneously the enzyme activity regenerates, the change of the Soret absorption during heating can be regarded as the result of both reversible and irreversible denaturation processes. Das thermische Verhalten der beiden Komponenten von Meerrettich-Peroxidase — des Apoenzyms und der prosthetischen Gruppe — wurde mit dem des Holoenzyms verglichen. Daraus wird geschlossen, daß die thermische Inaktivierung der Peroxidase in wäßriger Lösung nicht nur als Resultat einer Veränderung des Apoproteins angesehen werden kann. Vielmehr muß die gesamte dreidimensionale Struktur unter Einschluß der prosthetischen Gruppe in Betracht gezogen werden. Die Inaktivierungsvorgänge beim Holoenzym werden spektralphotometrisch verfolgt, wobei beobachtet wurde, daß die Extinktionsänderung der Soret-Bande mit der Verminderung der Enzymaktivität beim Erhitzen parallel geht. Da ein Wiederanstieg der Soret-Absorption im Verlaufe der Lagerung festgestellt und gleichzeitig eine Regenerierung der Enzymaktivität beobachtet wurde, ist die Änderung der Soret-Absorption beim Erhitzen die Folge sowohl reversibler als auch irreversibler Denaturierungsprozesse.