Analytical isoelectric focusing of secreted dermatophyte proteins applied to taxonomic differentiation ofMicroporumandTrichophytonspecies (preliminary studies)

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Abstract
Culture filtrates were prepared from dermatophytes under standard conditions and adapted for analytical isoelectric focusing in thin layer polyacrylamide gels over the pH range 3·5–9·5. Dermatophytes grown in trypticase soy broth secreted a large number of proteins displaying a wide range of isoelectric points (pls). Trichophyton megninii extracts contained a triplet of proteins focusing in the pH 8·0–8·5 range that were absent in taxonomically related T. kuryangei isolates. Single ascospore isolates and standard tester strains of Nannizzia otae (+) mating type were differentiated from the (−) mating type by proteins focusing at pH 6·5 and 8·4. These were markedly reduced in the (+) type. The isofocused pattern of Microsporum canis conformed closely to the (−) mating type of N. otae. The protein patterns of T. megninii and T. kuryangei were distinct from those obtained with M. canis and M. equinum because of an intense-staining broad protein band, pI 7·2, and three periodic acid-Schiff-positive glycoproteins focusing in the acidic range which were absent in the Microsporum species. A characteristic protein or doublet (pI 8·7) was present in the Microsporum species and absent in the Trichophyton sppecies. Analytical isoelectric focusing is a potentially useful method to distinguish inter- and intra-species differences in the pattern of secreted dermatophyte proteins present in culture filtrates and in trichophytins. The information derived may be useful in the classification of species. Des filtrats de cultures sont préparés à partir de dermatophytes dans des conditions standardisées, adaptées à l'analyse par isoélectrofocalisation en couche mince de gels de polyacrilamide à une échelle de pH allant de 3,5 à 9,5. Les dermatophytes cultivés en bouillon de soja-trypticase sécrètent un grand nombre de protéines qui montrent une étendue de points isoélectriques importante (pIs). Les extraits de Trychophyton megninii contiennenent des triplets de protéines focalisant entre les pH 8,0 et 8,5 qui sont absents dans les souches de T. kuryangei taxonomiquement proches. Les souches obtenues à partir d'une seule ascospore et les souches standard de Nannizzia otae de signe sexuel (+) diffèrent de celles de signe sexuel (−) par des protéines focalisant à pH 6,5 et 8,4. Elles sont réduites de façon marquée dans le signe (+). Le mode d'isofocalisation de Microsporum canis est proche de celui de N. otae de signe sexuel (−). Les profilę protéiques de T. megninii et de T. kuryangei sont distincts de ceux obtenus avec M. canis et M. equinum à cause d'une large bande protéique intensément colorée, pI 7,2, et de 3 glycoprotéines PAS positives, focalissant du côté acide de l'échelle des pH et qui sont absentes chez les Microsporum. Une protéine caractéristique ou doublet (pI 8,7) est présente chez les Microsporum et absente chez les Trychophyton. L'analyse par électrofocalisation est une méthode potentiellement utile pour distinguer les différences inter et intra spécifiques dans le profil des protéines sécrétées par les dermatophytes dans les filtrats de culture et dans les trychophytines. Les informations qui en résultent peuvent être utiles pour la classification des espèces.

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